بهینه سازی تولید آنزیم بتا ۱ و ۴ اندوگلوکاناز (سلولاز) قارچ aspergillus niger (r۴) و همسانه سازی ژن eglb
نویسندگان
چکیده
اندوگلوکاناز از آنزیمهای سلولازی می باشد که پیوندهای بتاگلوکوزیدی را به طور اتفاقی در ملکولهای سلولز قطع نموده وتولید قطعات کوتاه الیگوساکاریدی می کند. در این تحقیق، از جدایه r4 قارچ aspergillus niger جهت مطالعه میزان فعالیت آنزیم اندوگلوکانازی استفاده شد. بدین منظور اثر عوامل محیطی مختلف شامل منابع کربنی، القاء کننده ها، ph و زمان کشت مورد بررسی قرار گرفت. نتایج حاصله نشان داد که cmc به عنوان بهترین منبع کربنی، لاکتوز به عنوان القاء کننده، ph برابر 8 و روز دوم کشت به عنوان شرایط بهینه تولید آنزیم بتا 1 و 4 اندوگلوکاناز در این قارچ می باشند. همچنین جهت تکثیر و همسانه سازی ژن کد کننده آنزیم بتا 1 و 4 اندوگلوکانازb (eglb) از جدایه انتخابی، استخراج dna ژنومی به روش ctab صورت گرفت. برای تکثیر این ژن از دو آغازگر اختصاصی (egaf, egab) استفاده گردید و قطعه مورد انتظار به طول bp 1297 (با احتساب ترادف آنزیمهای برشی) به دست آمد. الگوی هضم آنزیمی (restriction pattern) توسط دو آنزیم hindii و psti قطعه مذکور را تأیید کرد. پس از تأیید همسانه سازی eglb تکثیر شده در ناقل puc19، ژن مذکور جهت تعیین توالی مورد استفاده قرار گرفت. مقایسه توالی dna ژن eglb همسانه سازی شده با توالیهای مشابه ثبت شده در بانک ژن نشان داد که توالی ژن eglb به دست آمده در این تحقیق با توالی ژن eglb قارچ a. niger با شماره ثبت aj224452 و قارچ a. niger cbs 513.88 با شماره ثبت xm001391932 و نیز توالی ژن eglc قارچ a. kawachii با شماره ثبت abo55433 به ترتیب برابر 6/93، 2/94 و 8/98 درصد مشابهت نشان می دهد در صورتی که این ژن با ژن eglb قارچ a. nidulans با شماره ثبت af420021 مشابهت چندانی از خود نشان نمی دهد.
منابع مشابه
بررسی فعالیت آنزیم بتا- ۱ و ۴ اندوگلوکاناز در سه نماتد بیمارگر گیاهی
دیواره سلولی گیاه میزبان، سد مکانیکی اصلی برای نفوذ و مهاجرت نماتدهای انگل گیاهی محسوب میشود. این نماتدها جهت تجزیه دیواره سلولی، انواع مختلفی از آنزیمهای تجزیه کننده دیواره سلولی را ترشح می‌کنند. بتا- 1 و 4 اندوگلوکاناز از اولین آنزیمهای تجزیه کننده شناخته شده در این ارتباط است. در این پژوهش، فعالیت آنزیم مذکور در سه گونه شاملMeloidogyne incognita ،Pratylenchus loosi ...
متن کاملبهینه سازی قارچ Trichoderma reesei جهت افزایش تولید آنزیم سلولاز از طریق تکنیک Mutation & Selection
قارچ Trichoderma reesei یک میکروارگانیسم سلولولتیک می باشد که به منظور تولید آنزیمهای سلولازی تحت شرایط تخمیر غوطه ور مورد استفاده قرار می گیرد. در این تحقیق، بعد از چندین مرحله جهش با موتاژن شیمیایی NTG و موتاژن فیزیکی uv، از مجموع 6500 کلونی بررسی شده از این قارچ، یک سویه سلولولیتیک کارآمد به نام 2: 6A به دست آمد که حداکثر میزان تولید آنزیم اگزوکلوکاناز توسط این سویه در روز چهارم U/ml 26/1...
متن کاملبهینه سازی قارچ trichoderma reesei جهت افزایش تولید آنزیم سلولاز از طریق تکنیک mutation & selection
قارچ trichoderma reesei یک میکروارگانیسم سلولولتیک می باشد که به منظور تولید آنزیمهای سلولازی تحت شرایط تخمیر غوطه ور مورد استفاده قرار می گیرد. در این تحقیق، بعد از چندین مرحله جهش با موتاژن شیمیایی ntg و موتاژن فیزیکی uv، از مجموع 6500 کلونی بررسی شده از این قارچ، یک سویه سلولولیتیک کارآمد به نام 2: 6a به دست آمد که حداکثر میزان تولید آنزیم اگزوکلوکاناز توسط این سویه در روز چهارم u/ml 26/1...
متن کاملتعیین توالی و بررسی خصوصیات مولکولی ژن بتا ۱ و ۴ اندوگلوکاناز سویه bacillus subtilis b۵d
این پژوهش به منظور تعیین برخی ویژگی های کاتالیتیکی و خصوصیات مولکولی ژن کدکننده آنزیم بتا 1و4 اندوگلوکاناز در سویهbacillus subtilis b5d انجام شد. ژن کدکننده این آنزیم در سویه b5d توسط آغازگرهای اختصاصی تکثیر، تعیین توالی و در پایگاه اطلاعاتی ncbi ثبت شد. تجزیه توالی حاصله و رسم درخت فیلوژنی با استفاده از نرم افزار vector nti و mega.4 انجام شد. براساس نتایج حاصله قطعه تعیین توالیشده شامل 794 ...
متن کاملجداسازی و بهینه سازی قارچ های تولید کننده آنزیم فیتاز از خاک های زراعی استان قم
فیتازها گروه ویژه ای از فسفاتازها می باشند که هیدرولیز مرحله به مرحله فسفات رااز مولکول فیتات انجام می دهند،فیتات منبع اصلی ذخیره فسفات در دانه گیاهان می باشد.این دسته ازآنزیم هادربین گیاهان، میکروارگانیسم ها وحیوانات پراکندگی وگستردگی دارند.ازمیان آنها فیتاز های میکروبی مورد توجه می باشند.آنزیم فیتاز به جیره غذایی حیوانات تک معده ای وهمچنین به منظور کاهش آلودگی فسفات در محیط اضافه می شود.جداسا...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
زیست شناسی ایرانجلد ۲۰۱۰، شماره ۰۲، صفحات ۶۸۲-۶۹۰
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023